本文对弯孢聚壳属真菌的化学成分和生物活性进行综述。目前从弯孢聚壳属真菌中发现的次级代谢产物类型主要包括二萜、细胞松弛素类、倍半萜、单萜、甾体、内酯类等。这些化学成分显示出抗肿瘤、抗菌、免疫抑制的活性。
基于“一种真菌一个名称”以及命名法的优先原则,曲霉属巢状亚属Aspergillus subgenus Nidulantes真菌的分类系统已发生很大的变化,原来属于裸胞壳属Emericella的种已全部转入曲霉属巢状亚属中,另外该亚属中种的概念也有所更新。本文基于国内外文献,对该亚属的分类现状、种的概念以及主要次生代谢产物产生情况进行了综述。同时基于钙调蛋白基因片段的分子系统发育树以及形态学观察,对收录于《中国真菌志·第五卷·曲霉属及其相关有性型》中的以及其他保存于中国普通微生物保藏中心的、来自于我国17个省及直辖市的裸胞壳属菌株进行了重新鉴定。
菰黑粉菌是茭白的内生真菌,对茭白孕茭具有重要作用。本文分离获得了13个不同茭白品种和孕茭表型的菰黑粉菌菌株(M-T型和T型),ITS序列鉴定分析发现:13个菌株都属于菰黑粉菌,它们的ITS序列仅在ITS1序列区间存在3个碱基位点的变异;基于ISSR技术比较分析了菰黑粉菌菌株间的遗传多态性,聚类分析表明,菰黑粉菌菌株的遗传多态性与茭白栽培特点及孕茭表型密切相关,本研究有助于茭白种质资源的鉴定及保护,并为茭白田间栽培管理提供了技术支持和理论依据。
本研究利用已测序的条形柄锈菌Puccinia striiformis f. sp. tritici基因组序列信息,结合已公布的隐匿柄锈菌Puccinia recondita f. sp. tritici和禾柄锈菌Puccinia graminis f. sp. tritici全基因组编码蛋白序列,运用生物信息数据库和分析软件对其碳水化合物酶类(CAZymes)基因家族进行了注释和比较分析。结果表明,3种小麦锈菌共包含1 232个CAZymes编码基因(含有1 279个模块)。其中,条形柄锈菌具有明显较大的CAZymes家族,3种锈菌的CAZymes具有136个同源基因;相对于隐匿柄锈菌和禾柄锈菌,条形柄锈菌的GH、GT和AA家族发生显著扩增,而3种锈菌的PL家族并无差异;CBM家族则表现为由禾柄锈菌、隐匿柄锈菌到条形柄锈菌的递增式扩增。通过CAZymes、细胞壁降解酶、分泌蛋白、PHI、保守基序等不同形式注释的比较分析表明,对该基因家族而言,条形柄锈菌相对于隐匿柄锈菌和禾柄锈菌呈扩增现象,隐匿柄锈菌和禾柄锈菌的家族缩减水平存在差异。小麦锈菌CAZymes家族整体呈现的不同形式扩增或缩减现象,可能反映了锈菌与寄主长期协同进化过程中的寄生适应性需求,进而反映了其致病性演化机理。本研究结果有助于进一步全面认识小麦锈菌CAZymes基因家族进化在锈菌致病性变异中的作用,为揭示锈菌致病分子机制提供理论基础。
辣椒疫霉菌Phytophthora capsici引起的辣椒疫病是世界性蔬菜病害,该病害严重发生常给辣椒生产造成严重损失。植物病原卵菌侵染寄主植物过程中常分泌大量的效应分子来促进自身的侵染与定殖,其中RxLR效应分子在病原卵菌侵染寄主及与寄主植物互作过程发挥着重要的作用。辣椒疫霉菌是一种重要的植物病原卵菌,本研究以辣椒疫霉菌标准菌株LT1534为材料,克隆鉴定了辣椒疫霉的一个效应分子,编号为RxLR121504,然后将其构建至PBIN-GFP2植物表达载体,利用农杆菌介导的瞬时表达技术、Western blot和亚细胞定位观察技术,较深入地开展了RxLR121504功能特性的研究。结果表明,RxLR121504能有效引起本氏烟寄主的过敏性坏死反应(HR),并对激发子INF1诱导的细胞坏死反应具明显的抑制效果,因此RxLR121504可能参与了辣椒疫霉菌抑制寄主的免疫抗菌过程。但RxLR121504对寄主植物的分子靶标尚未鉴定明确,该效应分子对寄主植物的分子机制有待进一步深入的研究。
漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,其作用底物范围广,在食品、能源和环保等领域具有重要的应用价值,因此筛选高产漆酶菌株对于其工业应用具有重要意义。本实验以78株香菇菌株为实验材料,利用愈创木酚平板法初筛,液体发酵复筛的方法筛选高产漆酶香菇菌株,并通过实时定量PCR分析香菇漆酶同工酶在不同菌株之间转录表达的差异性和特异性。结果表明,不同香菇菌株的生长速度、变色圈大小存在差异,以菌丝圈和变色圈大小及其比例为依据,从78株香菇菌株中筛选出19株潜在的漆酶高产菌株;液体发酵从这19株菌株中复筛出3株高产漆酶的菌株:香240、15和冕宁浅灰,其中香240在培养第3天酶活达到最高(3.583U/mL),香15和冕宁浅灰则在培养第7天酶活达到最高(分别为3.842U/mL和2.806U/mL);实时荧光定量PCR结果显示,10个漆酶同工酶基因在两株香菇菌株中的表达存在差异性和特异性,其中Lelac5和Lelac9只在菌株香240中检测到转录本;Lelac1-4在菌株15中表达量较高,而Lelac8、Lelac10和Lelac11在香240中的表达量较高。研究结果将为香菇漆酶的进一步研究提供基础。
木霉属真菌因具有拮抗植物病原真菌的能力而广泛用于农业生物防治。为提高初步筛选的效率,在对峙培养条件下探讨了不同木霉菌株的拮抗能力,将其分为强、中等、弱和无拮抗能力4种类型。在对峙培养中,具有强拮抗能力的木霉菌株生长速度快于植病菌,产生大量缠绕菌丝缠绕在植病菌的菌丝上,12d内在植病菌的菌落上大量产孢。具中等拮抗能力的木霉菌株表现为(1)生长速度较快或与植病菌相似,缠绕菌丝丰富,30d内在植病菌的菌落上少量产孢;(2)生长速度快,但缠绕菌丝较少或几近缺乏,12d内在植病菌的菌落上产孢丰富。具有弱拮抗能力的木霉菌株生长速度与植病菌的大致相同,缠绕菌丝较少,30d后在植病菌的菌落上少量产孢或不产孢。无拮抗能力的木霉菌株生长速度慢,常受植病菌菌落的限制,甚至被植病菌的菌落覆盖。上述分型和评价方法综合考虑了竞争和寄生等拮抗机制,可用于实验室内对木霉拮抗能力的快速初筛。
腾格里沙漠东南缘沙坡头地区所形成的微型生物结皮(microbiotic crust)占优势的生态格局是荒漠地区天然植被中特有的生态景观之一。荒漠地衣作为微型生物结皮中重要的组成部分,在影响生态变化方面扮演着不可或缺的角色。本研究调查了不同建立年代的人工植被固沙区中的维管植物和微型生物结皮中地衣的物种组成和盖度,测定了结皮土壤的主要养分含量。结果显示:微型生物结皮中地衣以胶衣Collema和石果衣Endocarpon两属为优势类群;随人工植被建立时间的延长,维管植物和微型生物结皮盖度、结皮厚度与土壤养分含量呈增高趋势,并基本呈显著的正相关关系。维管植物、微型生物结皮、地衣和土壤养分基本一致的变化规律表明,微型生物结皮对固沙区中浅根系植被发育和土壤恢复具有正效应,为人工高效治沙及全面实施“沙漠生物地毯工程”提供了必要的理论基础。
利用水提醇沉法对桦褶孔菌Lenzites betulina粗多糖HZKJc进行提取,随后经Sevage法和酶法联合脱蛋白,再经DEAE-Sephadex A-25,G-100柱层析纯化后得到多糖纯品HZKJv。通过高效液相色谱(HPLC)测定上述纯化多糖的纯度和相对分子量分布;经纸层析(PC)、气相色谱(GC)、红外光谱(IR)进行单糖组成分析;并研究其清除自由基活性。分离纯化后得到的HZKJv为纯多糖,相对分子质量约为11 687。当HZKJv溶液浓度为3.0mg/mL时,其DPPH自由基清除率可达82%;浓度为2.0mg/mL时,对·OH自由基的清除率可达85%。表明HZKJv对·OH与DPPH自由基存在很好的清除作用。
本文对硬毛粗盖孔菌子实体不同提取物的抗肿瘤活性进行筛选。通过建立H22荷瘤小鼠肿瘤移植模型,研究硬毛粗盖孔菌子实体的石油醚提取物、二氯甲烷提取物、乙酸乙酯提取物、甲醇提取物以及水提取物等5种提取物的高、中、低剂量组对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用,并对其H22荷瘤小鼠的抑瘤率、体质量、胸腺指数、脾脏指数、肝脏指数、肾脏指数进行了考察。对小鼠肿瘤、脾脏、肾脏进行了组织病理学检查,对血清中的细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ及TNF-α的含量进行测定。结果表明:各组分均有抑瘤效果,其中乙酸乙酯提取物中剂量组(1 000mg/kg)抑瘤效果最佳,与阴性对照组比较有极显著差异(P<0.01),并且这组的H22荷瘤小鼠血清中白介素‐2的含量显著增加,同时肿瘤细胞通过HE染色后,可观察到出现坏死面积增大,与抑制肿瘤活性具有相关性。
通过研究肿瘤抑制率、脾脏指数和胸腺指数、肿瘤切片细胞的形态以及血清中影响因子白细胞介素-2、肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ、丙二醛、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等指标的变化来考察玉木耳Auricularia cornea提取物体内抗肿瘤作用及其作用机理。结果表明,乙酸乙酯高、低剂量组的抑瘤效果较好分别为39.9%和37.5%;HE染色切片观察各组均出现肿瘤坏死区,高剂量出血坏死面积较低剂量大;与模型组比较,乙酸乙酯组白细胞介素-2、肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ含量升高,具有较好的免疫作用。玉木耳提取物具有明显的抗肿瘤作用,其中乙酸乙酯高、低剂量组的抗肿瘤作用最显著,与其增强免疫作用有一定关系。
盔孢伞属Galerina隶属于担子菌门Basidomycota蘑菇纲Agaricomycetes蘑菇目Agaricales球盖菇科Strophariaceae,目前该属全球已知300多种,多分布于北半球。中国报道30余种,目前20余种已得到确认,本文是对以往工作的补充。在对该属新近采集的标本进行研究时,发现3个中国新记录种,即小盔孢伞G. pumila、阿氏盔孢伞G. atkinsoniana和纹柄盔孢伞G. stylifera,对其进行详细的形态特征描述,并绘制其担子体宏观结构及光学显微镜下其担孢子、担子、缘生囊状体、柄生囊状体、菌盖表皮菌丝显微结构的线条图,提供了扫描电子显微镜的担孢子照片,对所研究材料进行DNA提取、PCR扩增、测序获得其ITS序列并上传到GenBank。下载GenBank中通过Blast比对所得该属北美序列及对该属分子系统学文献中的盔孢伞属欧洲序列,选择盔孢伞属的姊妹群裸伞属Gymnopilus作为外类群,并与所用材料获得的ITS序列结合,通过贝叶斯建立系统发育树。从系统发育树结果看,本文报道的3个新记录种皆与所下载的该种序列聚在一枝,且支持率较高,验证了3个新记录种的形态学鉴定结果。