菌物学报

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C₂H₂型转录因子AflAZF1在黄曲霉生长发育与毒素合成调控中的作用

林竑翊, 李明智, 郭慧华, 袁军, 汪世华, 王秀娜

菌物学报, 2026, 45(2): 250176. DOI: 10.13346/j.mycosystema.250176

图2 黄曲霉AflAZF1 缺失菌株的构建 A：黄曲霉AflAZF1缺失菌株构建原理图；B：WT和ΔAflAZF1 菌株的PCR验证. 疑似敲除株的转化子分别用T1、T2、T3和T4表示；野生型菌株WT作为阳性对照；CK以ddH₂O为模板，作为阴性对照；琼脂糖凝胶孔编号P1、P2、P3分别表示用引物P1、P2和P3的扩增结果. Marker: DL2000

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表1 本研究所用菌株的信息
表2 黄曲霉AflAFZ1基因缺失菌株构建中所用引物信息
图1 黄曲霉及其他真菌中AZF1蛋白的系统发育树及结构域分析 A：真菌中AZF1蛋白的进化树，其中所用的蛋白信息如下：AflAZF1 (XP_002378224.1, Aspergillus flavus NRRL3357)；AnAZF1 (A5ABV9.1, A. niger CBS 513.88)；AfAZF1 (EDP47468.1, A. fumigatus A1163)；TrAZF1 (XP_006961893.1, Trichoderma reesei QM6a)；Azf1p (NP_014756.3, Saccharomyces cerevisiae S288C)；CON1 (ABB89847.1, Pyricularia grisea)；ApAZF1 (KJK64458.1, A. parasiticus)；AoAZF1 (EIT80398.1, A. oryzae)；AnAZF1 (XP_664107.1, A. nidulans)；FgAZF1 (WXC62894.1, Fusarium graminearum)；AtAZF1 (GHJ86605.1, Arabidopsis thaliana). B：真菌中AZF1蛋白的结构域
图3 黄曲霉中AflAZF1对营养生长和分生孢子形成的影响 A：WT和ΔAflAZF1菌株的生长和产孢；B：WT和ΔAflAFZ1菌落直径的统计分析；相对生长=菌落直径/野生型菌落直径；C：WT和ΔAflAZF1产生的分生孢子统计分析；误差棒是表示5次重复的标准差，*表示P<0.05差异显著，**表示P<0.01差异极显著；下同
图4 AflAZF1基因的缺失导致黄曲霉不能形成菌核 A：WT和ΔAflAZF1在YEPS培养基上菌核形成的情况；B：WT和ΔAflAZF1在第7天时菌核数量的统计分析. ND表示检测不到菌核
图5 AflAZF1调控黄曲霉的碳源利用过程 A：WT和ΔAflAZF1在不同碳源培养基上的生长情况；B：WT和ΔAflAZF1在不同的碳源培养基上第5天时菌落直径的统计分析；C：WT和ΔAflAZF1分生孢子数量的统计分析
图6 AflAZF1调控黄曲霉适应酸碱环境的能力 A：WT和ΔAflAZF1在不同pH培养基上的生长情况；B：WT和ΔAflAFZ1菌落直径的统计分析；C：WT和ΔAflAZF1分生孢子数量的统计分析
图7 AflAZF1负调控黄曲霉毒素AFB₁的合成 A：WT和ΔAflAFZ1在YES培养基上产生黄曲霉毒素AFB₁的薄层层析分析，AFB₁为黄曲霉毒素标准品；B：WT和ΔAflAFZ1在YES培养基培养时AFB₁含量的定量分析，将AFB₁标品的浓度调整为1 μg/mL，利用GeneTools软件对毒素进行相对定量；下同
图8 AflAZF1影响黄曲霉侵染花生的能力 A：WT和ΔAflAZF1菌株在花生上的生长情况；B：WT和ΔAflAZF1在花生上产生分生孢子数量的定量分析；C：WT和ΔAflAZF1产生AFB₁的薄层层析分析；D：WT和ΔAflAZF1产生AFB₁含量的定量分析

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