灵芝是最重要的药用真菌之一，在我国已有2,000多年的记载和利用历史。虽然早在一百多年前法国真菌学家Patouillard就有给中国的灵芝冠上Ganoderma lucidum这一学名，并沿用至今，但随着分子生物学技术的不断发展，人们认识到过去外国人的定名并不正确。实际上，G. lucidum 是1871年由William Curtis根据采自英国的标本描述的新物种。最近的研究表明，我国广泛分布和栽培的灵芝与产于欧洲的G. lucidum不同，是一个独立的种，其合法的拉丁学名应为G. lingzhi。鉴于“灵芝”这一名称在中国已使用2,000余年，故建议“G. lingzhi”的汉语学名为“灵芝”（俗称赤芝），而灵芝属的模式种G. lucidum的汉语学名改为“亮盖灵芝”（俗称白肉灵芝或白灵芝）。灵芝Ganoderma lingzhi广泛分布于东亚暖温带和亚热带，其主要形态特征是孔口表面新鲜时浅黄色至硫磺色、成熟时菌肉中有黑褐色区带、管口壁厚度为80–120μm。亮盖灵芝G. lucidum主要分布于欧洲和亚洲，在我国分布于东北、华北、华中和西南海拔较高地区，其孔口表面新鲜时白色至奶油色、成熟时菌肉中无黑褐色区带、管口壁厚度为40–80μm。四川灵芝G. sichuanense尽管其担孢子与灵芝G. lingzhi相似，但基于其模式标本ITS序列的系统发育研究表明，该种与灵芝不同，是个独立的种，且在广东也有发现。

灵芝是最重要的药用真菌之一，在我国已有2,000多年的记载和利用历史。虽然早在一百多年前法国真菌学家Patouillard就有给中国的灵芝冠上Ganoderma lucidum这一学名，并沿用至今，但随着分子生物学技术的不断发展，人们认识到过去外国人的定名并不正确。实际上，G. lucidum 是1871年由William Curtis根据采自英国的标本描述的新物种。最近的研究表明，我国广泛分布和栽培的灵芝与产于欧洲的G. lucidum不同，是一个独立的种，其合法的拉丁学名应为G. lingzhi。鉴于“灵芝”这一名称在中国已使用2,000余年，故建议“G. lingzhi”的汉语学名为“灵芝”（俗称赤芝），而灵芝属的模式种G. lucidum的汉语学名改为“亮盖灵芝”（俗称白肉灵芝或白灵芝）。灵芝Ganoderma lingzhi广泛分布于东亚暖温带和亚热带，其主要形态特征是孔口表面新鲜时浅黄色至硫磺色、成熟时菌肉中有黑褐色区带、管口壁厚度为80–120μm。亮盖灵芝G. lucidum主要分布于欧洲和亚洲，在我国分布于东北、华北、华中和西南海拔较高地区，其孔口表面新鲜时白色至奶油色、成熟时菌肉中无黑褐色区带、管口壁厚度为40–80μm。四川灵芝G. sichuanense尽管其担孢子与灵芝G. lingzhi相似，但基于其模式标本ITS序列的系统发育研究表明，该种与灵芝不同，是个独立的种，且在广东也有发现。

为阐明日常的食用加工方法是否能充分利用灵芝（Ganoderma lingzhi）中的活性成分,用苯酚硫酸法和HPLC法分别检测龙芝二号子实体片经水煮、焖烧、水泡、酒浸四种加工处理的提取液中灵芝多糖和灵芝三萜含量,结果水煮、焖烧、水泡40min后多糖基本全部溶出,三萜溶出率分别为85.5%、83.1%、51.1%;50%的白酒浸泡7d后三萜溶出率为95.0%,而多糖溶出率仅为0.31%;用这些方法比较龙芝二号与菌草灵芝的处理结果,结果多糖和三萜溶出效果基本相同;通过比较,焖烧40min能使灵芝片中有效成分大部分溶出。

为阐明日常的食用加工方法是否能充分利用灵芝（Ganoderma lingzhi）中的活性成分,用苯酚硫酸法和HPLC法分别检测龙芝二号子实体片经水煮、焖烧、水泡、酒浸四种加工处理的提取液中灵芝多糖和灵芝三萜含量,结果水煮、焖烧、水泡40min后多糖基本全部溶出,三萜溶出率分别为85.5%、83.1%、51.1%;50%的白酒浸泡7d后三萜溶出率为95.0%,而多糖溶出率仅为0.31%;用这些方法比较龙芝二号与菌草灵芝的处理结果,结果多糖和三萜溶出效果基本相同;通过比较,焖烧40min能使灵芝片中有效成分大部分溶出。

脱脂大豆样品的乙醇提取物以AB－8大孔吸附树脂快速纯化得到总皂甙，用香草醛－高氯酸体系显色后测定总皂甙含量。以大豆皂甙B6为标样建立的回归曲线高度显著，线性和稳定性可靠。样品重复测定的变异系数CV＝5．72％，平均加标回收率为101．7％。测定结果表明脱脂大豆粕、子叶和胚芽中的皂甙含量分别为1．05％－1．25％，1．05％和4．82％。

脱脂大豆样品的乙醇提取物以AB－8大孔吸附树脂快速纯化得到总皂甙，用香草醛－高氯酸体系显色后测定总皂甙含量。以大豆皂甙B6为标样建立的回归曲线高度显著，线性和稳定性可靠。样品重复测定的变异系数CV＝5．72％，平均加标回收率为101．7％。测定结果表明脱脂大豆粕、子叶和胚芽中的皂甙含量分别为1．05％－1．25％，1．05％和4．82％。

【目的】建立同时测定灵芝子实体中灵芝酸C2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酮三醇、灵芝酸DM、灵芝酸T、灵芝醇B、灵芝酸S、灵芝酸G、灵芝酸F、灵芝酸D、灵芝稀酸B 12种三萜成分的高效液相色谱法。【方法】选用Aglient ZORBAX SB-Aq (4.6 mm×250 mm，5 μm)色谱柱，以乙腈-醋酸(0.01%)水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速1.0 mL/min，分析波长252 nm，柱温30 °C，对不同产地及品种的灵芝样品进行测定分析。【结果】同一产地不同品种间三萜类成分含量具有显著差异，不同产地的灵芝样品三萜成分含量也有显著差异，所建方法精密度高，稳定性和重复性好。【结论】所建方法适用于12种三萜成分的同时测定。

【目的】建立同时测定灵芝子实体中灵芝酸C2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酮三醇、灵芝酸DM、灵芝酸T、灵芝醇B、灵芝酸S、灵芝酸G、灵芝酸F、灵芝酸D、灵芝稀酸B 12种三萜成分的高效液相色谱法。【方法】选用Aglient ZORBAX SB-Aq (4.6 mm×250 mm，5 μm)色谱柱，以乙腈-醋酸(0.01%)水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速1.0 mL/min，分析波长252 nm，柱温30 °C，对不同产地及品种的灵芝样品进行测定分析。【结果】同一产地不同品种间三萜类成分含量具有显著差异，不同产地的灵芝样品三萜成分含量也有显著差异，所建方法精密度高，稳定性和重复性好。【结论】所建方法适用于12种三萜成分的同时测定。

我国灵芝科灵芝属药用真菌有80余种，常用的有赤芝、紫芝、松杉灵芝、树舌等。2005年版《中国药典》收载赤芝和紫芝为灵芝入药品种。灵芝作为传统中药已有几千年的历史，灵芝含有多种化学成分，近年来，随着人们对灵芝的广泛深入研究，已分离、纯化并阐明结构的三萜化合物112种，

我国灵芝科灵芝属药用真菌有80余种，常用的有赤芝、紫芝、松杉灵芝、树舌等。2005年版《中国药典》收载赤芝和紫芝为灵芝入药品种。灵芝作为传统中药已有几千年的历史，灵芝含有多种化学成分，近年来，随着人们对灵芝的广泛深入研究，已分离、纯化并阐明结构的三萜化合物112种，

灵芝是一种药用真菌,作为药用已有悠久历史.近30余年,我国广泛应用灵芝防治多种疾病(如慢性支气管炎、高血脂症、高血压病、神经衰弱、肝炎、白细胞减少)以及辅助治疗肿瘤等[1].

灵芝是一种药用真菌,作为药用已有悠久历史.近30余年,我国广泛应用灵芝防治多种疾病(如慢性支气管炎、高血脂症、高血压病、神经衰弱、肝炎、白细胞减少)以及辅助治疗肿瘤等[1].

采用分光光度法在550 nm波长下以齐墩果酸为对照品测定黑灵芝中性提取物中总三萜含量,测得黑灵芝中性组分中三萜含量为40.92％,RSD为3.28％,平均加标回收率为103.9％.通过对DPPH自由基清除作用、总还原能力、对β-胡萝卜素-亚油酸的抑制作用和对亚铁离子螯合能力的测定,评估了黑灵芝中性组分的抗氧化性.结果表明:它具有较强的抗氧化性.另外,用Folin-Ciocalteu酚方法测得黑灵芝中性组分的总酚含量为31 mg/g中性组分.据此,为黑灵芝质量评价及其中性组分开发应用提供一定的理论指导.

采用分光光度法在550 nm波长下以齐墩果酸为对照品测定黑灵芝中性提取物中总三萜含量,测得黑灵芝中性组分中三萜含量为40.92％,RSD为3.28％,平均加标回收率为103.9％.通过对DPPH自由基清除作用、总还原能力、对β-胡萝卜素-亚油酸的抑制作用和对亚铁离子螯合能力的测定,评估了黑灵芝中性组分的抗氧化性.结果表明:它具有较强的抗氧化性.另外,用Folin-Ciocalteu酚方法测得黑灵芝中性组分的总酚含量为31 mg/g中性组分.据此,为黑灵芝质量评价及其中性组分开发应用提供一定的理论指导.

目的：测定樟芝发酵菌粉三萜类化合物含量。方法：以齐墩果酸为对照品，以5％香草醛．冰醋酸 和高氯酸为显色剂，采用分光光度法在550nm测定样品的吸光度。结果：总三萜在20～140μg范围内呈良好的线性关系，其回归方程 为：Y=0．0049X-0．0184，R^2=0．9978。樟芝菌粉三萜类化合物含量为1．73％。结论：该方法操作简单，灵敏度高且比较准确。

目的：测定樟芝发酵菌粉三萜类化合物含量。方法：以齐墩果酸为对照品，以5％香草醛．冰醋酸 和高氯酸为显色剂，采用分光光度法在550nm测定样品的吸光度。结果：总三萜在20～140μg范围内呈良好的线性关系，其回归方程 为：Y=0．0049X-0．0184，R^2=0．9978。樟芝菌粉三萜类化合物含量为1．73％。结论：该方法操作简单，灵敏度高且比较准确。

灵芝酸是灵芝中除多糖外另一类具有广泛生理活性的物质,被证明具有止痛、镇静、抑制组织胺释放、解毒、保肝、抗肿瘤等活性。因此如何利用液态发酵大量生产灵芝酸对扩大其应用范围具有极其重要的意义。本文以实现发酵法大量生产灵芝酸为目的,就灵芝酸的测定方法、发酵-工艺、分离提取、结构鉴定开展研究工作,主要研究结果如下: 1.研究了灵芝酸的薄层层析定性检测方法,以甲苯:乙酸乙酯:乙酸(13:4:0.4)作为展层剂,用10%硫酸乙醇溶液显色,出现Rf 0.17,Rf 0.56,Rf 0.70三个斑点,且随着显色时间的增加,颜色由黄→红→紫→褐色,表明其为三萜类物质。建立了紫外分光光度法测灵芝酸含量的方法,标准曲线为C=(0.331×A254-0.004)×n,线性相关系数为0.9998,精密度实验、重复性实验和回收率实验的相对标准偏差分别为0.56%,3.6%,1.1%。表明此法准确可靠,且简便、快速。 2.研究了溶解氧对灵芝酸发酵的影响。结果表明:前48 h调节摇床转速175 rpm,48 h至发酵结束调节摇床转速75 rpm的培养方式下生物量、胞外灵芝酸及胞内灵芝酸的产量较自然发酵分别提高10.8%,14.5%,23.5%,总灵芝酸平均生产强度(5.43 mg/L·h)比自然发酵条件下(4.50 mg/L·h)提高了20.7%;先摇床培养96 h后静置培养60 h的方式下生物量、胞外灵芝酸及胞内灵芝酸的产量较自然发酵分别提高4.6%、56.1%、30.7%,总灵芝酸平均生产强度(3.84 mg/L·h)比自然发酵条件下(4.50 mg/L·h)降低了14.7%.研究了pH值对灵芝酸发酵的影响,未控制pH发酵条件下,生物量最大值达到了11.14 g/L;控制恒定pH 4.5的发酵条件下,有利于灵芝酸的生成,总灵芝酸产量最大为538.01 mg/L。由此提出了两段pH控制策略:发酵前期pH不加控制,当pH降至4.5时,控制pH在4.5,应用此策略生物量、胞外及胞内灵芝酸的产量较自然发酵分别提高了6.8%、7.5%、3.4%. 3.利用AB-8大孔吸附树脂提取分离发酵液中灵芝酸。实验结果表明上样的最佳条件为pH 2,流速为2 mL/min,此时AB-8树脂对灵芝酸的吸附量达8.837 mg/g。最佳洗脱方案为:水→20%乙醇→40%乙醇→95%乙醇。利用定性显色反应和薄板层析,鉴定了95%乙醇洗脱流分含有灵芝三萜类成分。大孔树脂95%乙醇洗脱组分经反相C-18柱和制备高效液相色谱分离,经HPLC检测分析,纯度达到92.5%.由其红外光谱,质谱和~1H-NMR图谱分析,确定该化合物的分子量为470,推断其为赤芝酸F甲酯,其分子式为C_(28)H_(38)O_6,其结构类型为Ⅳ型。 4.利用单因子试验和响应面法优化了菌丝体中灵芝酸的提取工艺。结果表明在乙醇浓度为93.6%(v/v)、提取温度79.1°C、提取液固比42.2:1、提取次数2次、每次提取时间2 h的条件下,灵芝酸的提取率最高,为28.72 mg/g干菌丝。将提取得到的灵芝酸,经有机溶剂萃取、硅胶柱层析等分离纯化步骤,得到组分A和组分B,薄层层析检测,各有一个主要斑点,其R~f值分别为0.70、0.56。

灵芝酸是灵芝中除多糖外另一类具有广泛生理活性的物质,被证明具有止痛、镇静、抑制组织胺释放、解毒、保肝、抗肿瘤等活性。因此如何利用液态发酵大量生产灵芝酸对扩大其应用范围具有极其重要的意义。本文以实现发酵法大量生产灵芝酸为目的,就灵芝酸的测定方法、发酵-工艺、分离提取、结构鉴定开展研究工作,主要研究结果如下: 1.研究了灵芝酸的薄层层析定性检测方法,以甲苯:乙酸乙酯:乙酸(13:4:0.4)作为展层剂,用10%硫酸乙醇溶液显色,出现Rf 0.17,Rf 0.56,Rf 0.70三个斑点,且随着显色时间的增加,颜色由黄→红→紫→褐色,表明其为三萜类物质。建立了紫外分光光度法测灵芝酸含量的方法,标准曲线为C=(0.331×A254-0.004)×n,线性相关系数为0.9998,精密度实验、重复性实验和回收率实验的相对标准偏差分别为0.56%,3.6%,1.1%。表明此法准确可靠,且简便、快速。 2.研究了溶解氧对灵芝酸发酵的影响。结果表明:前48 h调节摇床转速175 rpm,48 h至发酵结束调节摇床转速75 rpm的培养方式下生物量、胞外灵芝酸及胞内灵芝酸的产量较自然发酵分别提高10.8%,14.5%,23.5%,总灵芝酸平均生产强度(5.43 mg/L·h)比自然发酵条件下(4.50 mg/L·h)提高了20.7%;先摇床培养96 h后静置培养60 h的方式下生物量、胞外灵芝酸及胞内灵芝酸的产量较自然发酵分别提高4.6%、56.1%、30.7%,总灵芝酸平均生产强度(3.84 mg/L·h)比自然发酵条件下(4.50 mg/L·h)降低了14.7%.研究了pH值对灵芝酸发酵的影响,未控制pH发酵条件下,生物量最大值达到了11.14 g/L;控制恒定pH 4.5的发酵条件下,有利于灵芝酸的生成,总灵芝酸产量最大为538.01 mg/L。由此提出了两段pH控制策略:发酵前期pH不加控制,当pH降至4.5时,控制pH在4.5,应用此策略生物量、胞外及胞内灵芝酸的产量较自然发酵分别提高了6.8%、7.5%、3.4%. 3.利用AB-8大孔吸附树脂提取分离发酵液中灵芝酸。实验结果表明上样的最佳条件为pH 2,流速为2 mL/min,此时AB-8树脂对灵芝酸的吸附量达8.837 mg/g。最佳洗脱方案为:水→20%乙醇→40%乙醇→95%乙醇。利用定性显色反应和薄板层析,鉴定了95%乙醇洗脱流分含有灵芝三萜类成分。大孔树脂95%乙醇洗脱组分经反相C-18柱和制备高效液相色谱分离,经HPLC检测分析,纯度达到92.5%.由其红外光谱,质谱和~1H-NMR图谱分析,确定该化合物的分子量为470,推断其为赤芝酸F甲酯,其分子式为C_(28)H_(38)O_6,其结构类型为Ⅳ型。 4.利用单因子试验和响应面法优化了菌丝体中灵芝酸的提取工艺。结果表明在乙醇浓度为93.6%(v/v)、提取温度79.1°C、提取液固比42.2:1、提取次数2次、每次提取时间2 h的条件下,灵芝酸的提取率最高,为28.72 mg/g干菌丝。将提取得到的灵芝酸,经有机溶剂萃取、硅胶柱层析等分离纯化步骤,得到组分A和组分B,薄层层析检测,各有一个主要斑点,其R~f值分别为0.70、0.56。

目的测定灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉中的三萜含量,并评价其醇提物的体外抗肿瘤活性。方法采用高氯酸显色法测定灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉中的三萜含量,采用磺酰罗丹明B蛋白染色法（sulforhodamine B,SRB）评价灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉醇提物对宫颈癌He La细胞、结肠癌HCT-116细胞和乳腺癌MCF-7-ADM细胞的体外抗肿瘤活性。结果研究的灵芝子实体中三萜质量分数为0.92%,破壁灵芝孢子粉供试品中三萜质量分数实测值为2.95%,但是灵芝孢子粉中脂肪油对高氯酸显色法有极大的干扰,因此破壁灵芝孢子粉三萜的实测值可能远高于实际值。活性评价结果显示,灵芝子实体的醇提物在100μg/m L时,其对人宫颈癌He La细胞和乳腺癌MCF-7-ADM细胞表现出了较强的抑制作用,抑制率分别为94.54%和71.30%;对结肠癌HCT-116细胞表现出较弱的抑制作用,抑制率为20.68%。破壁灵芝孢子粉的醇提物在100μg/m L和10μg/m L时,其对宫颈癌He La细胞表现出了弱的抑制作用,对另外2种细胞系仅在100μg/m L时表现出较弱的抑制作用。结论灵芝子实体的醇提物含有三萜并具有较好的抗肿瘤活性,可以将其开发为辅助治疗癌症的药物或保健品。含有脂肪油的灵芝孢子粉直接采用高氯酸比色法测定会高估其三萜的含量,需要进一步开发准确、可行的测定方法。

目的测定灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉中的三萜含量,并评价其醇提物的体外抗肿瘤活性。方法采用高氯酸显色法测定灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉中的三萜含量,采用磺酰罗丹明B蛋白染色法（sulforhodamine B,SRB）评价灵芝子实体和破壁灵芝孢子粉醇提物对宫颈癌He La细胞、结肠癌HCT-116细胞和乳腺癌MCF-7-ADM细胞的体外抗肿瘤活性。结果研究的灵芝子实体中三萜质量分数为0.92%,破壁灵芝孢子粉供试品中三萜质量分数实测值为2.95%,但是灵芝孢子粉中脂肪油对高氯酸显色法有极大的干扰,因此破壁灵芝孢子粉三萜的实测值可能远高于实际值。活性评价结果显示,灵芝子实体的醇提物在100μg/m L时,其对人宫颈癌He La细胞和乳腺癌MCF-7-ADM细胞表现出了较强的抑制作用,抑制率分别为94.54%和71.30%;对结肠癌HCT-116细胞表现出较弱的抑制作用,抑制率为20.68%。破壁灵芝孢子粉的醇提物在100μg/m L和10μg/m L时,其对宫颈癌He La细胞表现出了弱的抑制作用,对另外2种细胞系仅在100μg/m L时表现出较弱的抑制作用。结论灵芝子实体的醇提物含有三萜并具有较好的抗肿瘤活性,可以将其开发为辅助治疗癌症的药物或保健品。含有脂肪油的灵芝孢子粉直接采用高氯酸比色法测定会高估其三萜的含量,需要进一步开发准确、可行的测定方法。

Abstract The objective of this study was to compare the mycochemical profiles, antioxidant activities, and antidiabetic effects of 2 species of genus Ganoderma, the red lingzhi (G. lucidum) and purple lingzhi (G. sinense) mushrooms. In Chinese medicinal practice, hot water and ethanol are used as solvents to extract samples. In this study, a total of 4 extracts (ethanol and hot water extracts from G. lucidum and G. sinense) were prepared for further assays. Hot water extracts presented much higher values for total phenolic content and ferric-reducing antioxidant power than the ethanol extracts. Ethanol (70%) extract of G. lucidum had the strongest -glycosidase inhibitory capacity, but the lingzhi polysaccharides showed no inhibitory effect. It also had the largest amount of total ganoderic acids. The results indicated that ethanol extracts from both G. lucidum and G. sinense showed better antidiabetic effects than the hot water extracts. Ganoderic acids, rather than polysaccharides, may contribute the antidiabetic effects of both the Ganoderma species.

Ganoderic acid Me (GA-Me) is a lanostane triterpenoid purified from Ganoderma lucidum mycelia, one of the most widely used herbs for cancer treatment and prevention in east Asia. In the present study, it was demonstrated that GA-Me could inhibit both tumor growth and lung metastasis of Lewis lung carcinoma in C57BL/6 mice. Compared with the control group, Natural Killer (NK) cells activity was significantly enhanced by intraperitoneal administration of GA-Me (2802mg/kg). Results of ELISA assay and RT-PCR showed that the expressions of Interleukin-2 (IL-2) and Interferon-γ (IFN-γ) were also increased (p<0.05). Additionally, the expression of Nuclear Factor-κB (NF-κB) was up-regulated after the treatment of GA-Me, which might be involved in the production of IL-2. In conclusion, the findings of this study implied that GA-Me could effectively inhibit tumor growth and lung metastasis through increasing immune function.

对农业部部颁备案灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉总三萜含量测定标准NY/SJ 339-2001进行优化,将齐墩果酸标准溶液浓度从1mg/mL优化为0.2mg/mL,取样体积范围从0.02~0.1mL优化为0.1~0.6mL,即样品质量范围从20~100μg变化为20~120μg;取样后添加沸水浴加热挥去溶剂这一优化步骤;显色剂5%香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸最适用量分别从0.2mL和0.5mL优化为0.1mL和0.8mL,显色稳定范围确定为10~30min。运用优化的检测方法可以获得很好的标准曲线,提高了R2值,且重复性好、回收率高,可作为灵芝孢子粉总三萜含量检测的一个简便、快速、准确的检测技术。

对农业部部颁备案灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉总三萜含量测定标准NY/SJ 339-2001进行优化,将齐墩果酸标准溶液浓度从1mg/mL优化为0.2mg/mL,取样体积范围从0.02~0.1mL优化为0.1~0.6mL,即样品质量范围从20~100μg变化为20~120μg;取样后添加沸水浴加热挥去溶剂这一优化步骤;显色剂5%香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸最适用量分别从0.2mL和0.5mL优化为0.1mL和0.8mL,显色稳定范围确定为10~30min。运用优化的检测方法可以获得很好的标准曲线,提高了R2值,且重复性好、回收率高,可作为灵芝孢子粉总三萜含量检测的一个简便、快速、准确的检测技术。

目的:揭示不同生长发育阶段灵芝生长与灵芝三萜酸含量的相关性,探索灵芝的最佳采收时期.方法:对不同生长发育阶段的灵芝,采用“烘干恒重法”测定干重,HPLC测定灵芝10种三萜酸的含量.采用Alltima C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.04％甲酸溶液,检测波长254 nm,流速1.0 mL/min,柱温15℃.结果:灵芝总三萜酸的含量在灵芝现蕾期、菌盖形成期变化不明显,弹孢前期最高,在弹孢后期显著降低.灵芝酸A是灵芝子实体内含量最高的灵芝三萜酸,7种灵芝酸的含量均在弹孢前期最高.结论:对灵芝生长和不同生长发育阶段灵芝三萜酸含量变化研究发现灵芝子实体最佳采收时期应该是灵芝弹孢前期.

目的:揭示不同生长发育阶段灵芝生长与灵芝三萜酸含量的相关性,探索灵芝的最佳采收时期.方法:对不同生长发育阶段的灵芝,采用“烘干恒重法”测定干重,HPLC测定灵芝10种三萜酸的含量.采用Alltima C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.04％甲酸溶液,检测波长254 nm,流速1.0 mL/min,柱温15℃.结果:灵芝总三萜酸的含量在灵芝现蕾期、菌盖形成期变化不明显,弹孢前期最高,在弹孢后期显著降低.灵芝酸A是灵芝子实体内含量最高的灵芝三萜酸,7种灵芝酸的含量均在弹孢前期最高.结论:对灵芝生长和不同生长发育阶段灵芝三萜酸含量变化研究发现灵芝子实体最佳采收时期应该是灵芝弹孢前期.

http://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S138358661100298X

Enterovirus 71 (EV71) is a major causative agent for hand, foot and mouth disease (HFMD), and fatal neurological and systemic complications in children. However, there is currently no clinical approved antiviral drug available for the prevention and treatment of the viral infection. Here, we evaluated the antiviral activities of two Ganoderma lucidum triterpenoids (GLTs), Lanosta-7,9(11),24-trien-3-one,15;26-dihydroxy (GLTA) and Ganoderic acid Y (GLTB), against EV71 infection. The results showed that the two natural compounds display significant anti-EV71 activities without cytotoxicity in human rhabdomyosarcoma (RD) cells as evaluated by 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) cell proliferation assay. The mechanisms by which the two compounds affect EV71 infection were further elucidated by three action modes using Ribavirin, a common antiviral drug, as a positive control. The results suggested that GLTA and GLTB prevent EV71 infection through interacting with the viral particle to block the adsorption of virus to the cells. In addition, the interactions between EV71 virion and the compounds were predicated by computer molecular docking, which illustrated that GLTA and GLTB may bind to the viral capsid protein at a hydrophobic pocket (F site), and thus may block uncoating of EV71. Moreover, we demonstrated that GLTA and GLTB significantly inhibit the replication of the viral RNA (vRNA) of EV71 replication through blocking EV71 uncoating. Thus, GLTA and GLTB may represent two potential therapeutic agents to control and treat EV71 infection.

分别运用分光光度法和HPLC法测定了灵芝子实体、菌丝体、孢子粉中三萜含量,发现不同方法所测得的含量差别较大。对不同的灵芝酸标准品及干扰物质油酸、麦角甾醇进行香草醛高氯酸的显色反应,发现不同的灵芝酸显色后最佳吸收波长在530—550 nm,在550 nm处的测定值相差很大,特别是灵芝中含量较高的灵芝酸A、B和C的测定值严重偏低,而干扰物质油酸和麦角甾醇对测定值具有严重的干扰。试验结果表明：采用分光光度法测定灵芝中总三萜的含量不能如实反应灵芝中总三萜的实际情况,不建议作为测定灵芝及其相关产品中总三萜含量的方法。

分别运用分光光度法和HPLC法测定了灵芝子实体、菌丝体、孢子粉中三萜含量,发现不同方法所测得的含量差别较大。对不同的灵芝酸标准品及干扰物质油酸、麦角甾醇进行香草醛高氯酸的显色反应,发现不同的灵芝酸显色后最佳吸收波长在530—550 nm,在550 nm处的测定值相差很大,特别是灵芝中含量较高的灵芝酸A、B和C的测定值严重偏低,而干扰物质油酸和麦角甾醇对测定值具有严重的干扰。试验结果表明：采用分光光度法测定灵芝中总三萜的含量不能如实反应灵芝中总三萜的实际情况,不建议作为测定灵芝及其相关产品中总三萜含量的方法。

Species of the Ganoderma lucidum complex are used in many types of health products. However, the taxonomy of this complex has long been chaotic, thus limiting its uses. In the present study, 32 collections of the complex from Asia, Europe and North America were analyzed from both morphological and molecular phylogenetic perspectives. The combined dataset, including an outgroup, comprised 33 ITS, 24 tef1伪, 24 rpb1 and 21 rpb2 sequences, of which 19 ITS, 20 tef1 , 20 rpb1 and 17 rpb2 sequences were newly generated. A total of 13 species of the complex were recovered in the multilocus phylogeny. These 13 species were not strongly supported as a single monophyletic lineage, and were further grouped into three lineages that cannot be defined by their geographic distributions. Clade A comprised Ganoderma curtisii, Ganoderma flexipes, Ganoderma lingzhi, Ganoderma multipileum, Ganoderma resinaceum, Ganoderma sessile, Ganoderma sichuanense and Ganoderma tropicum, Clade B comprised G. lucidum, Ganoderma oregonense and Ganoderma tsugae, and Clade C comprised Ganoderma boninense and Ganoderma zonatum. A dichotomous key to the 13 species is provided, and their key morphological characters from context, pores, cuticle cells and basidiospores are presented in a table. The taxonomic positions of these species are briefly discussed. Noteworthy, the epitypification of G. sichuanense is rejected.