Abstract: It is necessary to establish and optimize the ISSR-PCR reaction system for genetic diversity study of Agropyron cristatum(L.) Gaertn.Results show that the optimum concentration of seven reactants in 20 μL reaction mixture were as follows: 40 ng genomic DNA,0.2 mmol·L^-1 dNTP,0.5 μmol·L^-1 ISSR primer,1 U Taq DNA polymerase,2 μL 10× PCR buffer,2.5 mmol·L^-1 MgCl₂.The suitable annealing temperature of primer 815 was 50℃.This reaction system would provide the basis for the diversity analysis of A.cristatum with ISSR markers.

Key words: Wheatgrass, ISSR, PCR reaction system, Optimization

摘要： 为进一步开展冰草属植物种质资源遗传多样性研究,寻找可用于冰草(Agropyron cristatum(L.)Gaertn.)的ISSR-PCR最适反应体系并建立与优化,具有重要的意义。通过优化影响ISSR-PCR体系的主要参数,最终确定在20μL体系中各反应物的最适含量为:40 ng模板DNA,0.2 mmol·L^-1dNTP,0.5μmol·L^-1ISSR引物,1 UTaq DNA聚合酶,2μL10×PCR Buffer,2.5 mmol·L^-1MgCl₂;引物815号的最适退火温度为50℃。该体系的建立为今后利用ISSR技术进行冰草属种质资源的遗传多样性分析奠定了技术基础。

关键词: 冰草, ISSR, PCR反应体系, 优化